制備液相色譜儀的使用步驟
一、開機(jī)
1、接通電腦和儀器電源(接通電源之前可先把吸頭拿到要使用的流動相瓶中)；
2、開儀器電源開關(guān)，一般先上后下，下為檢測器開關(guān)；
3、檢查流動相是否夠，儀器上記錄的溶劑量時候正確；
4、開電腦；
5、打開儀器聯(lián)機(jī)軟件進(jìn)入界面，點擊啟動設(shè)置泵流速為10，此時儀器中應(yīng)該有液體流出；
6、點擊平衡然后點擊每個波長和調(diào)整；
沖一段時間，待壓力穩(wěn)定后可以進(jìn)樣。
二、進(jìn)樣
1、將進(jìn)樣器扭到load朝上，吸取一定量待分離液，快速注入，做過的是吸取0.2毫升；
2、點擊控制界面菜單欄中“運(yùn)行控制”按鈕—樣品信息—設(shè)置信息存儲路徑(每次都要做)；
3、扭動進(jìn)樣器，使處于inload狀態(tài)，保留時間開始計時；
4、接峰；
5、所有峰出來后，點擊菜單欄中的中斷—中斷，準(zhǔn)備重復(fù)進(jìn)樣。
三、關(guān)機(jī)
1、點擊中斷后沖幾分鐘，將流速設(shè)為0，待壓力為0后將吸頭轉(zhuǎn)移到甲醇中，并把流速設(shè)為10；
2、沖到已經(jīng)沒有東西被沖下為止，一般需要半個小時。一般此時壓力早已穩(wěn)定；
3、將流速設(shè)為0，點擊界面上的關(guān)閉(在啟動旁邊)；
4、關(guān)閉窗口，彈出的窗口都點肯定的，如確定是等。
制備液相色譜儀常見的故障
1、氣泡溢出
流動相內(nèi)有氣泡，關(guān)閉泵，打開泄壓閥，打開purg鍵，清洗脫氣，氣泡不斷從過濾器冒出，進(jìn)入液相色譜流動相，無論打開purge鍵幾次，都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi)，過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖，形成菌團(tuán)，阻塞了過濾器，緩沖液難以流暢地通過過濾器，空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，超聲清洗幾分鐘即可；亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12～36小時，輕輕震蕩幾次，再將過濾器用純水清洗幾次，打開泄壓閥，打開purge鍵清洗脫氣，如仍有氣泡不斷從過濾器冒出，繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中，如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出，說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團(tuán)已被硝酸破壞，流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥，打開泵，流速調(diào)至1.0～3.0ml/min，純水沖洗過濾器1小時左右。即可將過濾器清洗干凈。關(guān)閉泄壓閥，純甲醇沖洗半小時即可。
2、峰面積重復(fù)性不佳
(1)進(jìn)樣閥漏液。
(2)加樣針不到位。
(3)液量不足。處理對于*種情況更換進(jìn)樣閥墊圈；對于第二種情況保證加樣針插到底，注射樣品溶液后須快速、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài)，以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中，液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要，如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中，儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液，每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈，防止無機(jī)鹽析出或沉積；樣品的前處理也很重要，任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì)，*溶解，盡量減少對色譜柱的污染，以延長色譜柱的使用壽命，同時避免注射過濃的樣品溶液，以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞；色譜柱作好標(biāo)記，用于不同分析目的的色譜柱不要混用等。
3、柱壓高原因
(1)緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi)。
(2)樣品污染沉積。處理對于*種情況先用40～50℃的純水，低速正向沖洗柱子，待柱壓逐漸下降后，相應(yīng)提高流速沖洗，柱壓大幅度下降后，用常溫純水沖洗，之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘；對于第二種情況，由樣品的沉積引起污染的C18柱，和純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再用換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
4、既無壓力指示，又無液體流過
(1)泵密封墊圈磨損。
(2)大量氣泡進(jìn)入泵體。處理對于*種情況，更換密封墊圈；對于第二種情況，在泵作用的同時，用一個50ml的玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。
5、壓力波動大，流量不穩(wěn)定
原因系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物，使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量，保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底，避免吸入空氣，流動相要充分脫氣。如為單向閥和閥座之間夾有異物，拆下單向閥，放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗。
6、出峰不佳，峰分叉
(1)色譜柱被污染。
(2)柱頭填料塌陷。處理對于*種情況，先用純水反向沖洗柱子，然后換成甲醇沖洗，接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定)，再換成甲醇沖洗，然后用純水沖洗，zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。如沖洗后依然出峰不佳，則考慮第二種情況。對于第二種情況，擰開柱頭，檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料)，裝入新填料，滴一滴甲醇，填料下陷，再填，用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊，再填平，滴甲醇，再壓緊反復(fù)幾次，直至裝滿填平。柱頭用甲醇沖洗干凈，擦凈柱外壁的填料，擰緊柱頭，用純甲醇沖洗30分鐘以上。
以上便是今天關(guān)于使用制備液相色譜儀的時候遇到故障不要怕，趕緊收藏本文的全部分享了，希望對大家今后使用本設(shè)備能有幫助。
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